invivogen Zeocin說(shuō)明書(shū)
| Zeocin™ (solution) | Unit size | Cat. code |
|---|---|---|
Selective antibiotic for the Sh ble gene | 500 mg (5 x 1ml) 1g (10 x 1 ml) 5g (50 x 1 ml) 5 g (50 ml bottle) | ant-zn-05 ant-zn-1 ant-zn-5 ant-zn-5b |
| Zeocin™ (powder) | Unit size | Cat. code |
|---|---|---|
Selective antibiotic for the Sh ble gene | 1 g (powder) 5 g (powder) | ant-zn-1p ant-zn-5p |
InvivoGen 是全球的 Zeocin™ 生產(chǎn)商。
Zeocin™ 是腐草霉素D1的制劑，一種由Streptomyces CL990生產(chǎn)的銅螯合糖肽抗生素 。 Zeocin™ 通過(guò)嵌入 DNA 并切割 DNA 來(lái)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
Zeocin™ 的作用對(duì)大多數(shù) 需氧細(xì)胞有效。因此，Zeocin™ 是一種流行且有效的抗生素，用于 在各種細(xì)胞類(lèi)型（細(xì)菌、真核微生物、植物和動(dòng)物細(xì)胞）中選擇帶有Sh ble基因的載體 。
Zeocin™ 抗性是由來(lái)自印度鏈球菌的Sh ble基因產(chǎn)物賦予的，它在與抗生素結(jié)合后使 Zeocin™ 失活 [1-3]。Sh ble是一個(gè) 370bp 大小的小基因，在許多 InvivoGen 的載體中都攜帶。
通常，哺乳動(dòng)物細(xì)胞對(duì) 50-400 µg/ml 的 Zeocin™ 濃度敏感，而細(xì)菌對(duì) 25 µg/ml 的濃度敏感。
僅供研究使用
參考：
1. Drocourt D. 等，1990。用于將低等和高等真核生物轉(zhuǎn)化為腐草霉素抗性的 Streptoalloteichus hindustanus ble 基因盒。核。酸。水庫(kù) 18: 4009。2
. Gatignol A. 等人，1988 年。FEBS快報(bào)。230：171-5。
3. Dumas P. 等，1994. Embo J. 242 (5) 595-601。
InvivoGen 的 Zeocin™產(chǎn)品濃度： 100 mg/ml 溶液
CAS號(hào)： 11006-33-0
質(zhì)量控制：每個(gè)批次都經(jīng)過(guò)*測(cè)試，以確保沒(méi)有批次間的差異。
內(nèi)毒素水平： < 1 EU/mg
理化表征： HPLC、pH、外觀
細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試：在 Zeocin™ 敏感和 Zeocin™ 抗性哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中驗(yàn)證效力
微量污染物的非細(xì)胞毒性：在 Zeocin™ 抗性細(xì)胞中證實(shí)沒(méi)有長(zhǎng)期影響
回到頂部Zeocin™ 以無(wú)菌過(guò)濾藍(lán)色溶液的形式提供，濃度為 100 mg/ml，在 HEPES 緩沖液中。
本產(chǎn)品提供三種包裝尺寸：
ant-zn-1： 10 x 1 毫升（1 克）
ant-zn-5： 50 x 1 毫升（5 克）
ant-zn-5b： 1 x 50 毫升（5 克）
Zeocin™ 也以藍(lán)色粉末形式提供：
ant-zn-1p： 1 x 1 克
ant-zn-5p： 1 x 5 克
Zeocin™ 在室溫下運(yùn)輸。
收到后應(yīng)在 4°C 或 -20°C 下儲(chǔ)存。
Zeocin™ 是一種有害化合物。有關(guān)操作說(shuō)明，請(qǐng)參閱安全數(shù)據(jù)表。
Zeocin™ 通常以 100 μg/ml 的濃度使用，是原液的 1000 倍稀釋液。但是，需要為您的細(xì)胞確定最佳濃度。
下面列出了在某些哺乳動(dòng)物細(xì)胞示例中選擇的 Zeocin™ 的建議濃度：
細(xì)胞系 | 中等的 | Zeocin™ 濃 | 參考 |
|---|---|---|---|
B16（小鼠黑色素細(xì)胞） | RPMI | 20-250 微克/毫升 | 1-3 |
CHO（中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞） | DMEM | 100-500 微克/毫升 | 1、4、5 |
COS（猴腎細(xì)胞） | DMEM | 100-400 微克/毫升 | 6、7 |
| HEK293（人胚胎腎細(xì)胞） | DMEM | 100-400 微克/毫升 | 8、9 |
| HeLa（人類(lèi)子宮細(xì)胞） | DMEM | 50-100 微克/毫升 | 10、11 |
| J558L（小鼠黑色素細(xì)胞） | RPMI | 400 微克/毫升 | 12 |
| MCF-7（人乳腺腺癌細(xì)胞） | DMEM | 100-400 微克/毫升 | 13、14 |
| MEF（小鼠胚胎成纖維細(xì)胞） | DMEM | 200-400 微克/毫升 | 15、16 |
| THP-1（人類(lèi)單核細(xì)胞） | RPMI | 200 微克/毫升 | 17 |
參考：
1. Bouayadi K. 等，1997。DNA 聚合酶 beta 的過(guò)度表達(dá)使哺乳動(dòng)物細(xì)胞對(duì) 2',3' 脫氧胞苷和 3'-疊氮基-3'-脫氧胸苷敏感。癌癥研究。57：110-116。
2 Hirose Y. 等人，2012 年。抑制 Stabilin-2 可提高循環(huán)透明質(zhì)酸水平并防止腫瘤轉(zhuǎn)移。PNAS, 109: 4263 - 4268.
3. Fan H. et al., 2012. 使用碳納米管的腦內(nèi) CpG 免疫療法消除了小鼠皮下黑色素瘤的生長(zhǎng)。臨床癌癥研究 18(20):5628-38。
4. Li F. 等人，1996 年。重組 P 選擇糖蛋白配體 1 的翻譯后修飾，這是與 P 和 E 選擇結(jié)合所需的。J.生物。化學(xué) 271：3255-3264。
5. Ogura T. 等人，2004 年。B16 黑色素瘤細(xì)胞對(duì) CD47 誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)負(fù)調(diào)節(jié)的抗性，這是由于 SHPS-1 的異常 N-糖基化所致。J 生物化學(xué)。279（14）：13711-20。
6. Saxena A. 等，2002。H2，人類(lèi)去唾液酸糖蛋白受體的次要亞基，在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸并形成同源寡聚體，但不結(jié)合去唾液酸-口粘蛋白。J 生物化學(xué)。277(38):35297-304。
7. Kanamori A. 等人，2002. 使用支持所有三種選擇素在剪切流下介導(dǎo)的滾動(dòng)的細(xì)胞公開(kāi)了選擇素的不同硫酸化要求。L-選擇素更喜歡碳水化合物 6-硫酸化酪氨酸硫酸化，而 p-選擇素則不然。J 生物化學(xué)。277(36):32578-86。
8. Ahmed 等人，2013 年。TRIF 介導(dǎo)的 TLR3 和 TLR4 信號(hào)傳導(dǎo)受到 ADAM15 的負(fù)調(diào)控。J免疫學(xué)。190（5）：2217-28。
9. Büllesbach EE。& Schwabe C.，2006。松弛素樣因子 (RLF) 與富含亮氨酸重復(fù) G 蛋白激活受體的相互作用模式 8。J Biol Chem。281(36):26136-43。
10. Mesnil M. et al., 1996. 單純皰疹病毒胸苷激酶基因?qū)Π┘?xì)胞的旁觀者殺傷是由連接蛋白介導(dǎo)的。PNAS 93(5):1831-5。
11. Maszczak-Seneczko D. 等人，2013 年。UDP-N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 (SLC35A3) 調(diào)節(jié)高度支化 N-聚糖和硫酸角質(zhì)素的生物合成。J 生物化學(xué)。288(30):21850-60。
12. Cedeno-Laurent F. 等人，2010 年。開(kāi)發(fā)用于研究白細(xì)胞 galectin-1 配體和免疫疾病調(diào)節(jié)作用的新生 galectin-1 嵌合分子。J免疫學(xué)。185（8）：4659-72。
13. 金 HS。等人，2004 年。胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白 3 通過(guò) MCF-7 人乳腺癌細(xì)胞中的死亡受體介導(dǎo)途徑誘導(dǎo)半胱天冬酶依賴(lài)性細(xì)胞凋亡。癌癥研究。64（6）：2229-37。
14. 列出 HJ。等人，2001 年。核酶靶向表明核受體輔激活因子 AIB1 是人類(lèi) MCF-7 乳腺癌細(xì)胞雌激素依賴(lài)性生長(zhǎng)的限速因子。J 生物化學(xué)。276（26）：23763-8。
15. Waak J. 等，2009。介導(dǎo)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和 DJ-1 與細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 1 的細(xì)胞保護(hù)相互作用的可氧化殘基。J Biol Chem。284（21）：14245-57。
16. Maue A. 等人，2013 年?？漳c彎曲桿菌的多糖膠囊調(diào)節(jié)宿主免疫反應(yīng)。感染免疫。81(3):665-72
你們提供的 Zeocin™ 是鹽酸還是硫酸鹽？
我們提供鹽酸 Zeocin™。
Zeocin™ 是光敏的嗎？
不，Zeocin™ 不具有光敏性。
Zeocin™ pH 值敏感嗎？
Zeocin™ 在低和高 pH 值（<6 和 >8）或弱氧化劑存在下會(huì)發(fā)生不可逆的變性。
什么緩沖液可用于稀釋 Zeocin™ 以制備中間工作溶液？
應(yīng)在無(wú)菌水中進(jìn)一步稀釋?zhuān)詣?chuàng)建中間工作溶液。
用于重構(gòu) Zeocin™ 的 HEPES 緩沖液的濃度是多少？
用于重構(gòu) Zeocin™ 的 HEPES 緩沖液濃度為 5 g/L。
Zeocin™ 的儲(chǔ)存方法是什么？
Zeocin™ 在室溫下運(yùn)輸。收到后，應(yīng)在 4°C 下短期儲(chǔ)存或在 -20°C 下長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
避免重復(fù)的凍融循環(huán)。
有效期在產(chǎn)品標(biāo)簽上注明。
對(duì)于 Zeocin™ 粉末，一旦以 100 mg/ml 重懸，它可以在 4°C 下儲(chǔ)存 12 個(gè)月或在 -20°C 下儲(chǔ)存 18 個(gè)月。
對(duì)于 Zeocin™ 溶液，一旦打開(kāi)，它可以在 -20°C 下保持穩(wěn)定 1 年，避免重復(fù)凍融循環(huán)，如果保持在無(wú)菌條件下，它可以在 4°C 下保存 3 個(gè)月。
Zeocin™ 在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的選擇濃度是多少？
Zeocin™ 在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中的工作濃度在 50 - 400 μg/ml 之間變化，有少數(shù)報(bào)道使用較低（即 20 μg/ml）和較高（即 1000 μg/ml）濃度的案例。在初始實(shí)驗(yàn)中，我們建議確定殺死宿主細(xì)胞系所需的最佳 Zeocin™ 濃度。有關(guān)更多詳細(xì)信息，請(qǐng)參閱該產(chǎn)品的技術(shù)數(shù)據(jù)表。
Zeocin™ 在大腸桿菌中的選擇濃度是多少？
在補(bǔ)充有 25 μg/ml Zeocin™ 的低鹽 LB 瓊脂中選擇 Zeocin 抗性轉(zhuǎn)化體。
重要提示：不要使用含有 Tn5 轉(zhuǎn)座因子（即 MC1066）的大腸桿菌受體菌株。Tn5 編碼一種博萊霉素抗性基因，可賦予 Zeocin™ 抗性。
