RTP DNA/RNA VIRUS MINI KIT
RTP ® DNA / RNA病毒微型試劑盒包含用于從一個(gè)不同的范圍的起始原料的病毒DNA和RNA分離凍干的溶解成分的預(yù)填充提取管。裂解后，將樣品轉(zhuǎn)移至基于旋轉(zhuǎn)柱的程序，在25分鐘內(nèi)完成PCR / RT-PCR模板的總制備時(shí)間。
| 起始材料 | 平均產(chǎn)量 | 準(zhǔn)備時(shí)間 |
|---|---|---|
| 高達(dá)200μl血清，血漿，無細(xì)胞體液，細(xì)胞培養(yǎng)上清液， 多400μl沖洗液從拭子 高達(dá)10 mg組織樣品 糞便懸浮液 | 取決于病毒滴度 | 大約25分鐘 |
使用RTP DNA / RNA病毒試劑盒，將樣品在含有凍干的裂解試劑和載體核酸的預(yù)填充的提取管中裂解。裂解試劑進(jìn)一步穩(wěn)定病毒核酸，使RNase和DNase失活，并增強(qiáng)對旋轉(zhuǎn)過濾器膜的選擇性DNA / RNA吸附。在洗脫病毒核酸之前，有效洗滌膜以*除去所有PCR抑制劑。
*）符合關(guān)于體外醫(yī)療設(shè)備的歐盟指令98/79 / EC。根據(jù)IVD指令進(jìn)行CE標(biāo)記的產(chǎn)品可用于識別該指令的國家/地區(qū)的診斷應(yīng)用。
| 產(chǎn)品 | 包裝尺寸 | 目錄號 |
|---|---|---|
| RTP DNA / RNA病毒迷你試劑盒 | 50個(gè)凈化 | 1040100200 |
| RTP DNA / RNA病毒迷你試劑盒 | 250純化 | 1040100300 |
應(yīng)用
1.敏感的病毒RNA分離
將200μl人血漿樣品摻入甲型流感病毒（1:10稀釋系列），并使用RTP DNA / RNA病毒Mini試劑盒（藍(lán)線）和Invisorb Spin Virus RNA Mini試劑盒（紅線）分離病毒RNA。該圖顯示了實(shí)時(shí)擴(kuò)增結(jié)果，一式三份進(jìn)行分析。黑色曲線代表陰性對照。
2.病毒DNA的可重復(fù)恢復(fù)
使用RTP DNA / RNA Virus Mini Kit從摻有500個(gè)HBV拷貝的10個(gè)不同血漿樣品（200μl）中分離病毒DNA。將病毒DNA（綠色和藍(lán)色曲線）在100μl中洗脫，并在HBV特異性實(shí)時(shí)PCR測定中分析2.5μl（每拷貝12.5個(gè)拷貝 - 理論量）。平均Ct標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.41。紅色曲線代表陽性對照。
3.敏感檢測HBV病毒
使用RTP DNA / RNA Virus Mini Kit從200μlHBV感染的患者血清樣品中分離病毒DNA，并在60μl緩沖液中洗脫。使用用于乙型肝炎病毒（HBV）基因組的RoboGene Quantification Module分析樣品。該測試在ABI PRISM 7000 SDS上進(jìn)行。每個(gè)RT-PCR運(yùn)行使用5μl洗脫的HBV樣品DNA。
陽性樣品：HBV陽性血清
樣品1：3000基因組當(dāng)量/ ml
樣品2：5,400,000基因組當(dāng)量/ ml
陰性樣品：HBV陰性血清，從健康獻(xiàn)血者獲得
數(shù)據(jù)顯示陽性樣品的擴(kuò)增（1,2）。其他曲線代表即用型HBV DNA對照的擴(kuò)增（稀釋系列從每孔1,000,000至10個(gè)分子對照條帶）。
數(shù)據(jù)由德國萊比錫Roboscreen GmbH的T.Köhler博士提供。
4.從咽拭子樣本中敏感檢測流感病毒
制備稀釋系列的甲型流感/ H3N2病毒（菌株：來自107至103的Moskau）：使用RTP DNA / RNA Virus Mini Kit分離病毒RNA。將25μl洗脫的病毒RNA用于轉(zhuǎn)錄成cDNA，并將5μlRT-PCR產(chǎn)物用于TaqMan分析以檢測病毒感染。
將來自具有低濃度甲型流感病毒的患者的咽拭子在4ml培養(yǎng)基中擠出。使用RTP DNA / RNA Virus Mini Kit從200μl該培養(yǎng)基的等分試樣中分離病毒RNA。將25μl用于轉(zhuǎn)錄成cDNA，并將5μlRT-PCR產(chǎn)物用于TaqMan分析以檢測病毒感染。
數(shù)據(jù)由德國柏林Robert-Koch研究所的Schweiger博士提供
