目錄號：IQ479
£226.00
目標(biāo)抗原
CD44
主要說明
小鼠抗CD44 [156-3C11]
目錄編號
IQ479
數(shù)量
0.1毫升
濃度
3.2mg / ml的
克隆
156-3C11
主辦
老鼠
同型
的IgG2a
免疫原
刺激人體白細(xì)胞
特異性
該抗體對CD44H分子的表位3具有特異性
物種反應(yīng)性
人類，狒狒
純化
蛋白質(zhì)A.
格式
PBS中純化的抗體+ 0.1％疊氮化na
應(yīng)用
IHC-P，流式細(xì)胞
稀釋液
宜抗體稀釋應(yīng)通過滴定確定，但作為指導(dǎo)，嘗試以1:10進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)
參考
白細(xì)胞分型V，牛津大學(xué)出版社（1995）
數(shù)據(jù)庫
Entrez Gene：101008690狒狒
Entrez Gene：960人類
Omim：107269人類
SwissProt：P16070 Human
Unigene：502328人類
也稱為
LHR抗體; BA-1抗體; CD44抗體; CD44抗體; CD44抗原抗體; CD44分子（印度血型）抗體; CD44分子抗體; CD44_HUMAN抗體; CDw44抗體;細(xì)胞表面糖蛋白CD44抗體;硫酸軟骨素蛋白多糖8抗體;抗體CSPG8抗體; ECMR-III抗體; Epican抗體;細(xì)胞外基質(zhì)受體III抗體; GP90淋巴細(xì)胞歸巢/粘附受體抗體; HCELL抗體;造血細(xì)胞E-和L-選擇素配體抗體;硫酸乙酰肝素蛋白多糖抗體; Hermes抗原抗體;歸巢功能和印度血型系統(tǒng);抗體; HSA抗體; HUTCH-I抗體; HUTCH1抗體;透明質(zhì)酸受體抗體; IN抗體; MC56抗體; MDU2抗體; MDU3抗體; MGC10468抗體; MIC4抗體; MUTCH1抗體; PGP-1抗體; PGP -I抗體; PGP1抗體;吞噬糖蛋白1抗體;吞噬糖蛋白I抗體
本產(chǎn)品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。
免疫熒光方案 - 甲醛固定
1.從Tcunit收集細(xì)胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
2.用1x PBS洗滌并取出。
3.在室溫下在軌道振蕩器上將細(xì)胞在預(yù)熱（37℃）對甲醛中孵育12分鐘。
4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5％Triton X-100中孵育5分鐘。
5.準(zhǔn)備封閉試劑，這也是抗體稀釋劑。
6.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
7.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
8.準(zhǔn)備一抗（50μl/蓋玻片）和濕潤染色室。
9.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次并短暫風(fēng)干。
10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時。在此期間準(zhǔn)備二抗。
11.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次（每個燒杯更換5個燒杯/ 5個計數(shù)）
12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時。
13.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次。
14.登上達(dá)皮。
溶液（染色當(dāng)天新鮮制備）。
* 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
*封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
*固定液：3.5％對甲醛。
1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應(yīng)為7.4。完成體積，d.H20至25ml，加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。
免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定
1.從TCunit收集細(xì)胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
2.用1x PBS洗滌并取出。
3.用冷甲醇：丙酮1：1在冰上固定細(xì)胞10分鐘。
4.制備阻斷試劑，這也是抗體的稀釋劑。
5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞3次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
6.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
7.準(zhǔn)備一抗（50？l /蓋玻片）和濕染色室。
8.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次并風(fēng)干約7分鐘。
9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時，在染色室中避光。在此期間準(zhǔn)備二抗。
10.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次（每個燒杯更換5次燒杯/ 5次計數(shù)）
11。在室溫下，在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時。
12.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次。
13.登上達(dá)皮。
溶液（染色當(dāng)天新鮮制備）
* 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
*封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
*固定液：甲醇：丙酮1：1冰冷。
Western Blotting Protocol
1.將凝膠轉(zhuǎn)移到PDVF或硝酸纖維素膜上
2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時
3.在洗滌緩沖液中沖洗
4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時
5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時
7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
8.檢測（例如ECL，Amersham根據(jù)制造商的說明）
洗滌緩沖液
PBS + 0.1％Tween 20
阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5％奶粉
所用抗體的濃度取決于每種抗體，抗原的量和所用的檢測方法。通常，稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內(nèi)，但通常必須憑經(jīng)驗(yàn)確定。
